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    基于NanoBRET™TE的细胞内激酶细胞测定服务

    发布时间: 2021-05-31  点击次数: 527次

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    用于晶体学的超纯蛋白质的定制生产

    我们与加拿大公司IniXium Inc.的合作使我们能够为客户提供对结构测定和晶体学应用的超纯,高质量蛋白质。我们了解准确确定小分子与其靶标的结合状态以促进高效化合物的发现和优化的重要性。晶体结构分析可以是迅速有效地实现这一目标的强大方法!晶体学研究人员的专业团队通过定制生产最高等级的蛋白质,使其成为可能。

    服务特色

    我们的服务首先为您的报价提供报价,包括周转时间和费用。为便于为结构分析和基于片段的药物发现提供最佳蛋白质,我们的服务包括在开始实际蛋白质生产之前进行“通过/不通过讨论。

    审查和讨论项目进度,以便在实际生产之前决定是否进行

    使用行之有效的技术与经验丰富的晶体学专业人员联系

    专注于出色的细菌和哺乳动物细胞表达系统

    哺乳动物表达优于昆虫表达的IniXium

    时间/成本效益方法

    ●跳过费力的病毒储备制备/放大步骤

    ●迅速放大以达到产量的克数

    靶标范围更广

    ●某些蛋白质仅在哺乳动物系统中可行

    更接近原生目标

    哺乳动物细胞中的糖基化更像天然的

    基于NanoBRET™TE的细胞内激酶细胞测定服务

    量化激酶抑制剂在自然发生结合的细胞环境中的占有率,选择性,亲和力,对于更准确地预测其对抗人激酶的结合力至关重要。除了平衡评估外,还希望获得动力学参数(如“停留时间”)以更好地优化化合物。使用NanoBRET™目标参与细胞内激酶测定系统(Promega)进行定量和广谱激酶分析服务,使您能够评估化合物在生理条件下对选定细胞内靶标的参与度,包括化合物在靶标上的停留时间,同时保持细胞完整。

    提交您感兴趣的化合物,Carna将迅速提供蜂窝IC 50 值和停留时间!

    研究表达全长激酶的完整细胞中的化合物功能

    一种示踪剂涵盖了广泛的激酶研究

    在细胞ATP环境下提高了选择性

    [1μM克唑替尼的目标占有率]

    (右)使用HEK293中的细胞内激酶

    (左)使用在Carna MSAKm ATP生化分析的重组激酶

    NanoBRET™系统

    通过测量从生物发光蛋白供体(NanoLuc®荧光素酶)到荧光探针(NanoBRET™示踪剂)的能量转移,这种基于接近度的测定法可检测活细胞中的蛋白质相互作用。NanoBRET™TE分析法通过竞争性置换NanoBRET™示踪剂来测量测试化合物的表观亲和力,该示踪剂可逆结合至活细胞中表达的NanoLuc®萤光素酶激酶融合蛋白。

    将一种可渗透细胞的荧光NanoBRET™示踪剂(一种BRET受体)添加到表达全长激酶/NanoLuc®融合蛋白的HEK293细胞中。示踪剂与靶蛋白的结合产生BRET信号

    测试化合物与靶蛋白的结合导致靶蛋白与完整细胞内部示踪剂之间的NanoBRET™信号丢失

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