服务热线
15201163601
-
甲状腺球蛋白抗原
发布时间： 2025-06-23 点击次数： 105次甲状腺球蛋白抗原
BNP和NT-proBNP自由血浆，EDTA
猫编号# 8BFP
本数据表仅提供信息。点击下面的按钮将产品添加到购物车后，您将看到是否有批量折扣。
猫编号。
8BFP
来源：
混合正常人EDTA血浆。
对献血者采集的血样进行了检测，结果为乙肝表面抗原（HBsAg）、人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）和2型（HIV-2）抗体及丙型肝炎病毒（HCV）阴性。
应用：
BNP和NT-proBNP游离血浆不含完整的前BNP分子和任何前BNP片段（BNP和NTproBNP）。它可以用于制备任何前BNP相关标准品和校准品，用于基于检测任何种类的前BNP相关肽的免疫分析。
净化：
免疫亲和层析法分离混合的人正常血浆。
用于亲和柱的凝胶是通过将具有不同表位特异性的抗BNP和抗NTproBNP单克隆抗体与BrCN活化的Sepharose CL 4B偶联制备的。
展示：
冷冻液体。
存储：
-20 °C（允许 -15 … -30 °C）
材料安全注意事项：
此产品仅售用于研究或进一步制造。处理此材料时应遵循标准实验室操作程序。
以下是为您翻译的《人proBNP、BNP和NT-proBNP技术说明》，在翻译过程中，我严格遵循了医学领域的专业术语规范，并保留了原文的格式结构：
技术说明
血液凝固与贫血 • 骨代谢 • 心脏标志物 • 生育与妊娠 • 激素标志物 • 免疫学与血清学 • 传染病 • 炎症 • 肾脏疾病 • 代谢综合征 • 神经科学 • 甲状腺疾病 • 肿瘤标志物 • 兽医学
人proBNP、BNP和NT-proBNP
脑钠肽（BNP）及其前体proBNP的N末端部分（NT-proBNP）是已确立的心力衰竭（HF）诊断和预后生物标志物。心力衰竭是一个严峻的临床和公共卫生问题，其患病率和经济成本持续上升。根据美国心脏协会的数据，美国有650万人患有心力衰竭，每年新增病例近100万（1）；全球范围内，患病率超过2300万人。慢性心脏病、高血压和糖尿病是已知的危险因素，且65岁以上人群的心力衰竭患病率更高。心力衰竭与显著的发病率和死亡率相关。
BNP、NT-proBNP和proBNP作为诊断标志物
临床指南建议在疑似急性心力衰竭患者的初始评估中测量BNP或NT-proBNP，以排除心力衰竭。这两种标志物也可用于监测疾病进展。BNP和NT-proBNP的临床价值相似（2-3），目前均在临床实践中应用。
在健康成年人中，血浆BNP的上限为35 pg/ml，NT-proBNP的上限为125 pg/ml（4）。然而，这些值取决于年龄和性别，老年人和女性的值更高。
分析物的浓度与疾病严重程度相关，可升高数百倍。有报道称，在心力衰竭的极早期（根据纽约心脏协会分类为NYHA I期），无症状患者的两种肽浓度已升高。NYHA II期和III期，尤其是IV期患者，血液中BNP和NT-proBNP浓度显著升高。因此，人体血液中的肽测量广泛用于疑似心力衰竭患者的评估和疾病严重程度的判断。
测定BNP或NT-proBNP浓度也有助于不同心脏疾病患者的风险分层。未来会出现并发症的患者，其BNP和NT-proBNP浓度显著高于无并发症的患者。在充血性心力衰竭患者中，高BNP或NT-proBNP水平可预测死亡，且与心血管风险相关。同时，在急性冠脉综合征患者中，两种肽的水平升高可预测死亡率和严重心力衰竭。
除NT-proBNP和BNP外，心力衰竭患者的血液样本中还存在大量其前体proBNP1-108。仅检测proBNP的检测方法可能具有更高的分析特异性。
临床应用
- 识别或排除心力衰竭
- 评估心力衰竭的严重程度
- 预测疾病发展
- 监测心力衰竭患者的药物治疗
proBNP及其衍生物的生物化学
编码BNP的基因在心肌细胞中因压力或容量超负荷引起的心肌牵张而被激活，导致合成一个134个氨基酸残基（a.a.r.）的细胞内前体肽preproBNP。去除信号肽后，前体肽进一步加工，释放出具有生物活性的BNP（32个氨基酸残基）和无已知生物活性的NT-proBNP（76个氨基酸残基）。BNP、NT-proBNP以及未加工的proBNP均分泌到血液中并在人体血液中循环（见图1）。BNP从循环中被有效清除，其半衰期约为20分钟。NT-proBNP的半衰期更长，为60-120分钟，这解释了为什么血液中NT-proBNP的浓度明显高于BNP。
proBNP加工示意图
preproBNP翻译并切割信号肽后形成proBNP，随后在多个位点发生O-糖基化，形成T71糖基化状态不同的两部分proBNP：T71未糖基化和该位点糖基化的分子。糖基化会抑制proBNP的后续加工，只有T71未糖基化的proBNP才能有效加工成BNP和NT-proBNP。未加工的proBNP、NT-proBNP和BNP释放入血。
proBNP是一种O-糖基化蛋白，已鉴定出7个糖基化位点（5）。所有糖基化位点均位于NT-proBNP部分，而BNP未被糖基化。
我们之前的研究表明，氨基酸T71的糖基化状态对proBNP加工成BNP和NT-proBNP至关重要。T71位于切割位点附近，只有当T71未被糖基化时，依赖转化酶的切割才能发生。因此，循环中发现的大部分未加工proBNP在T71上带有O-聚糖，而NT-proBNP中的同一氨基酸未被糖基化（6）。
免疫测定开发试剂
在Hytest，我们多年来一直致力于研究proBNP及其衍生物，并在同行评审期刊上发表了多篇文章（详情见第10-11页）。我们提供多种经过充分表征的单克隆抗体（MAbs），可用于开发灵敏可靠的免疫测定方法，适用于临床样本中proBNP、NT-proBNP和BNP的检测。
我们还提供不同的重组抗原，可作为免疫测定中的标准品和校准品。
BNP检测开发
人BNP是一种3.5 kDa的肽，由proBNP切割成NT-proBNP（N端部分）和BNP（C端部分）形成。BNP由proBNP的氨基酸77-108组成，但在BNP分子中，氨基酸通常编号为1-32。BNP的计算等电点为10.95。
BNP是一种具有利钠、血管舒张和肾素抑制特性的肽激素（7-9），属于结构相似的肽激素家族，还包括心房利钠肽（ANP）、C型利钠肽（CNP）和尿钠肽。这些肽的特征是由两个半胱氨酸残基之间的二硫键形成的17个氨基酸的环结构，不同利钠肽的环结构高度同源，17个氨基酸残基中有11个相同。在人BNP中，二硫键位于C10和C26之间（见图2）。
人BNP示意图及不同蛋白酶的主要蛋白水解降解位点
DPP IV为二肽基肽酶IV，NEP为中性内肽酶（脑啡肽酶），IDE为胰岛素降解酶。
BNP是一种不稳定分子（10-11）。多项研究表明，心力衰竭患者血浆中的BNP以多种形式存在，N端和C端均被截断，只有一小部分BNP以完整的BNP1-32分子形式循环（12）。已报道蛋白酶如二肽基肽酶IV（DPP IV）和中性内肽酶（脑啡肽酶，NEP）可降解BNP，分别生成BNP3-32和BNP5-32（13-14）。一些研究表明，胰岛素降解酶（IDE）也可将BNP降解为更小的肽（15-16）。BNP蛋白水解降解的已知位点总结于图2。
人血液中的BNP免疫反应形式
由于proBNP切割成NT-proBNP和BNP的过程不全，且取决于蛋白质的翻译后糖基化，因此BNP和proBNP均释放入循环。除非表位被蛋白酶截断破坏，否则这些形式均可被BNP分子特异性抗体识别。我们使用凝胶过滤分析心力衰竭患者的血浆样本，并通过高度敏感的抗体对50E1-24C5测量各组分的BNP免疫反应性，该抗体对能够以相同的特异性检测不同的BNP形式。凝胶过滤研究结果显示，BNP检测在所有样本中均检测到两个具有BNP免疫反应性的峰。第一个峰代表proBNP形式，第二个较小的峰代表BNP形式（见图3）。我们之前的研究表明，人体血液中主要的BNP免疫反应形式是未加工的proBNP（17）。
常规BNP夹心免疫测定
我们提供多种对BNP分子不同表位具有特异性的单克隆抗体（见图4）。多种不同的单克隆抗体组合可用于开发高度特异性、灵敏且快速的常规型夹心免疫测定，适用于人血液中BNP和proBNP的定量测量。表1显示了常规夹心免疫测定的推荐抗体对组合。
所有推荐的捕获-检测对均以相同效率检测BNP肽和未加工的proBNP蛋白（见图5）。但需要注意的是，市售BNP检测对proBNP的交叉反应性各不相同（18-20）。所有推荐的组合均已用心力衰竭患者的血浆样本进行测试。由于抗体在不同检测平台上的性能可能不同，我们建议在开发免疫测定时至少尝试四到五种双位点单克隆抗体组合，以确保选择在给定检测条件和平台上表现佳的组合。
作为BNP免疫测定的标准品，我们建议使用重组糖基化proBNP（货号8GBP3，见第8页），因为血液中的BNP免疫反应性主要由糖基化proBNP代表。
NT-proBNP检测开发
NT-proBNP是proBNP的N端部分，由76个氨基酸和7个O-糖基化位点组成，尚未发现NT-proBNP具有生物活性。其半衰期是BNP的3-6倍，这意味着它在临床样本中是一种更稳定的标志物。NT-proBNP的临床价值与BNP相似，计算等电点为8.45，分子量为8.5 kDa，但由于糖基化，其表观分子量更高（17）。
糖基化对NT-proBNP检测的影响
我们的研究表明，NT-proBNP的糖基化会对某些抗体的识别产生负面影响。由于O-糖基化，NT-proBNP分子的中央部分（氨基酸残基28-56）难以被抗体接近，而区域13-27和61-76则易于识别。
为了阐明糖基化如何影响NT-proBNP的测量，我们使用两种检测方法分析了8名心力衰竭患者去糖基化前后的血浆：一种使用对无糖基化位点区域具有特异性的抗体（15C4-13G12），另一种使用其中一个抗体对糖基化位点区域具有特异性的抗体（11D1-13G12）。图7显示，去糖基化对后一种检测有显著影响。
proBNP检测开发
我们和其他人的研究表明，除NT-proBNP和BNP外，心力衰竭患者的血液样本中还存在大量其前体proBNP1-108（17,25-26）。proBNP的计算等电点为10.12，分子量为11.9 kDa，但由于O-连接糖基化，其表观分子量更高（26）。
现有大多数市售BNP和NT-proBNP检测均不同程度地与proBNP发生交叉反应，这种交叉反应可能会使BNP和NT-proBNP的相关性更接近proBNP。
血液中proBNP的水平已被证明与BNP和NT-proBNP高度相关，并可用于识别在长期随访中具有心血管死亡高风险的心力衰竭患者（27）。另一项研究表明，循环proBNP水平与心血管不良事件风险增加相关，且独立于BNP（28）。
与市售的BNP和NT-proBNP检测相比，仅检测proBNP1-108的检测可能具有更高的分析特异性。
重组蛋白
重组糖基化人proBNP**：我们提供在哺乳动物细胞系中表达的重组proBNP（货号8GBP3），该蛋白被糖基化，在SDS-PAGE中迁移为表观分子量在20-25 kDa之间的弥散条带（见图15）。我们建议使用糖基化proBNP作为BNP和proBNP免疫测定的标准品。
在大肠杆菌中表达的人重组（非糖基化）proBNP**：人重组proBNP（货号8PRO9；氨基酸残基1-108）在大肠杆菌中表达，除N端额外有一个Met残基外，该多肽序列与内源性蛋白相同。该抗原可被BNP特异性单克隆抗体（货号4BNP2）以及所有NT-proBNP特异性单克隆抗体（货号4NT1）识别。根据Tricine-SDS-PAGE和HPLC研究，proBNP高度纯化，纯度超过95%。该抗原可作为BNP、NT-proBNP和proBNP免疫测定中的校准品或标准品。
重组非糖基化NT-proBNP**：人重组NT-proBNP（货号8NT2；氨基酸残基1-76）在大肠杆菌中表达，除N端额外有一个Met残基外，该多肽序列与内源性NT-proBNP相同。该抗原可被对NT-proBNP不同部分具有特异性的单克隆抗体（货号4NT1）识别。根据Tricine-SDS-PAGE和HPLC研究，NT-proBNP的纯度超过95%，该抗原可作为NT-proBNP检测中的校准品或标准品。
抗原
产品名称 货号 纯度 来源
NT-proBNP, 重组 8NT2 >95% 重组
ProBNP, 重组 8PRO9 >95% 重组
ProBNP, 糖基化, 重组 8GBP3 >95% 重组
耗竭血浆
货号 来源
BNP和NT-proBNP游离血浆8BFP 混合正常人血浆
请注意，本技术说明中显示的结果是使用体内产生的单克隆抗体获得的，细胞培养产生的单克隆抗体预计具有与体内产生的单克隆抗体相似的性能。
品牌是Hytest Hytest北京z代理 Hytest 天津z代理 Hytest深圳z代理 Hytest 上海z代理 Hytest湖北z代理 Hytest湖南z代理 Hytest江苏z代理 Hytest河南z代理 Hytest河北z代理 Hytest石家庄z代理 Hytest深圳z代理 Hytest广东z代理
Hytest北京z代理 hytest天津z代理 hytest代理 hytest上海z代理 hytest促 hytest让利 hytest广东z代理 hytest深圳z代理hytest福建z代理 hytest河北z代理 hytest河南z代理 hytest山东z代理 hytest山西z代理 hytest内蒙古z代理 hytest安徽z代理 hytest江苏z代理 hytest江西z代理