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MS-MLPA的原理
发布时间： 2025-06-09 点击次数： 67次甲基化特异性MLPA (MS-MLPA) 是SALSA® MLPA®®技术的一种变体。通过MS-MLPA，可以同时对多个目标进行半定量的甲基化分析。
MS-MLPA 探针
如同常规MLPA探针混合物，MS-MLPA探针混合物包含靶向特定基因组序列的探针。每个探针由两部分组成：左探针寡核苷酸（LPO）和右探针寡核苷酸（RPO）。MS-MLPA探针混合物中的某些探针靶向包含甲基化敏感性HhaI内切酶限制位点的区域。这些探针可用于甲基化分析。
MS-MLPA的原理
探针与样品DNA上的目标序列杂交。然后使用HhaI酶消化未甲基化的双链探针-DNA复合物。
与未甲基化样本DNA形成的复合物会被消化。消化后的探针无法呈指数级扩增，因此不会产生信号。与甲基化样本DNA形成的复合物不会被HhaI消化，并将产生正常信号。
MS-MLPA 反应
MS-MLPA 的步骤与MLPA的步骤非常相似。重要的区别是反应在过夜杂交后被分为未消化和已消化的反应。
未消化的反应用于拷贝数测定。在消化反应中，用于甲基化分析，HhaI酶与Ligase-65酶同时加入。
数据分析
Coffalyser™ 用于分析数据。拷贝数与常规 MLPA 的方法相同，通过未消化反应来确定。DNA 样品中的甲基化百分比是通过将消化反应中的每个探针信号与未消化反应中的相应信号进行比较来确定的。
完成
对您的MLPA数据进行完整分析。
质量
对您的样品和实验进行广泛的的质量控制。
Coffalyser™ 是 免费的、用户友好型 MLPA 分析软件，由 MRC Holland 开发和支持，帮助您充分利用您的数据。
高级质量控制
一个专为MLPA设计的高级质量检查系统帮助您评估从片段分离的质量和MLPA反应到参考样品的再现性的一切内容。这些检查有助于防止您基于不良数据得出结论，并提高您对结果可靠性的信心。
可视化您的数据的所有方面
Coffalyser 允许您以多种方式可视化和分析您的数据。您可以查看电泳图、表格，或专注于带有拷贝数比率的图表。对于更复杂的病例和故障排除，您可以查看中间分析步骤的结果。要讨论或存储您的结果，您可以将总结导出为 PDF。
获取新信息
关于我们的产品的新信息可以直接从Coffalyser内部从我们的服务器获取。这确保了您在收到新产品后即可开始分析。Coffalyser的更新始终是免费的，确保您始终从新的见解中受益。
入门指南
要开始使用，请通过您的免费账户生成一个免费的许可证密钥并下载Coffalyser。有关安装帮助，请参阅我们的安装手册。有关如何开始进行第一次分析的信息
分析证书
COA 版本 04；发布于 2021 年 5 月 28 日
SALSA MLPA
SALSA® MLPA® 试剂盒分析证书
目录编号
产品名称
SALSA MLPA 试剂盒
规格
100、500 或 2000 次反应
运输条件
干冰或冷却元件
储存条件
到货后存放在 - 25°C 至 - 15°C 之间
有效期
MLPA 试剂有效期：见附录 A（在推荐条件下储存时）。本产品冻融次数不得超过 25 次
用途
本试剂盒仅用于与 SALSA（MS-）MLPA 探针组合结合，按（MS-）MLPA 通用协议进行（MS-）MLPA 分析
质量控制标准
- 使用专用质量控制探针组合测试杂交速度、连接酶 - 65 活性和聚合酶活性。新旧批次之间的引物峰变异 < 20%。参考样本群体内和样本群体内的变异 < 10%（大标准差 0.10）。残留引物 % 低于 40%。专用测试探针的探针比率在 0.8-1.2 之间。无 DNA 反应仅显示 64、70、76 和 82 nt 的对照片段。
- 通过使用与 PCR 引物具有广泛同源性的 LPO 混合物，对 PCR 引物混合物进行类似引物二聚体的峰形成测试。类似引物二聚体的峰低于探针峰平均高度的三倍。
- 对连接酶缓冲液 B 进行批次间电导率变异测试，变异 < 10%。
- 使用 5 ng DNA 对引物峰变异进行测试（不适用于连接酶缓冲液 A 和连接酶 - 65）。变异应≤20%。
- 稳定性测试（在 37°C 下孵育 1 周）。新旧批次之间的引物峰变异 < 20%。参考样本群体内和样本群体内的变异 < 10%（大标准差 0.10）。残留引物 % 低于 40%。专用测试探针的探针比率在 0.8-1.2 之间。无 DNA 反应仅显示 64、70、76 和 82 nt 的对照片段。倾斜度 < 60%。测试结果
合格
本证书是生产过程中的分析声明。所有检测均按照制造商的使用说明进行。本 COA 是适用于所有 SALSA MLPA 试剂盒批次的通用证书。有关批次详情，请见附录 A
品牌是MRC Holland MRC Holland北京z代理 MRC Holland 天津z代理 MRC Holland深圳z代理 MRC Holland 上海z代理 MRC Holland湖北z代理 MRC Holland湖南z代理 MRC Holland江苏z代理 MRC Holland河南z代理 MRC Holland河北z代理 MRC Holland石家庄z代理 MRC Holland深圳z代理 MRC Holland广东z代理
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