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    Transnetyx组织常见问题

    发布时间: 2022-08-25  点击次数: 494次

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    北京华新康信也有transnetyx实验试剂销售,对transnetyx组织常见问题做了解答如下:

    /Transnetyx 组织常见问题解答 | Transnetyx 组织

    文化传媒

    1.培养基 (Neurobasal ® /B27 ® /GlutaMAX™) 能稳定多久?

    Transnetyx的培养基可在 4 o C 避光保存长达 6 个月。为防止氧化,可以将培养基分装成更小的体积并储存在 4 o C

    2. 我需要多久进行一次媒体交换?

    Transnetyx 3 4 天更换 1/2 培养基,但这部分取决于细胞密度。参见 INVITROGEN (LTI) FOCUS 16:6。如果细胞密度高于 500/mm 2,则每 2 天更换 1/2

    3. NbActiv1™ NbActiv4® 有什么区别?

    NbActiv4® 含有与 NbActiv1™ 相同的成分以及胆固醇、雌激素和肌酸。NbActiv4® 主要用作电生理学介质。  

    4. 铺板海马培养物时,通常向 NbActiv1™ (Neurobasal ® /B27 ® /GlutaMAX™) NbActiv4® (Neurobasal ® /B27 ® /GlutaMAX ) 添加 25uM 谷氨酸

    /胆固醇/雌激素/肌酸)直至培养第 4 天。谷氨酸的目的是什么?

    它帮助海马神经元发芽并促进活力。在 DIV4 后,应使用不含谷氨酸的培养基进行半次培养基交换。

    5.漏掉谷氨酸有问题吗?

    DIV4 中,您的存活率将降低约 30%

    6. 如果我在 NbActiv1™ 中培养细胞,我可以将培养基更换为 NbActiv4® 吗?

    是的,在培养过程中的任何时候,培养基都可以从 NbAcitv1™ 更改为 NbActiv4®。然而,事实并非如此。接种在 NbActiv4® 中的细胞不应更换为 NbActiv1™

    7.我需要哪些额外的用品来维持培养物?

    每个订单包含足够的培养基以开始培养并维持 4 5 天。除此之外,您还需要更多培养基,Transnetyx可以通过 Invitrogen 单独购买完整的即用型配方。您还需要选择镀膜玻璃或塑料基材,Transnetyx推荐使用聚-D-赖氨酸作为基材。除此之外,您还需要解离溶液,Transnetyx推荐Transnetyx Papain and Hibernate® E-Ca 和火抛光移液器。Transnetyx将所有这些用品都包含在Transnetyx的完整培养套件中。

    8.我应该在电镀培养基中添加抗生素/抗真菌剂吗?例如:pen/strep/fungizone 还是庆大霉素?

    Transnetyx通常在不使用抗菌抗生素和抗真菌剂的情况下进行培养,并取得了很好的成功。这具有三个优点:

    首先,当出现污染时,更容易识别污染源。其次,如果你使用抗生素,当你被感染时,就更难摆脱了。第三,抗生素已被证明可以激活神经元中的癫痫样爆发活动。使用抗生素是一种常见的做法,类型和浓度取决于最终用户。

    Hibernate® 媒体

    Hibernate ®Neurobasal ® B27 ® 仅用于研究目的,由 Invitrogen Corporation 制造。Hibernate ®Neurobasal ® B27 ® Invitrogen Corporation 的商标。

    1. Hibernate® Media 能稳定多久?

    Transnetyx Hibernate 可在 4 o C 的黑暗中保存长达 1 年。为防止氧化,可以将培养基分装成更小的体积并储存在 4 o C

    2.您是否总是在 Hibernate® 中添加 B27® GlutaMAX™,还是仅在 Hibernate® 中保持细胞存活?

    几乎总是。请参见 Brewer Price (1996) PM:8856709 的图 1 37 o C 环境 CO 2中,Neurobasal®/B27®/GlutaMAX™ 中的 LD50 24 小时,而在 Hibernate®/B27®/GlutaMAX® 中为大于 3 天。

    3.Transnetyx可以提供定制的 Hibernate 配方吗?

    是的,Transnetyx可以提供定制的 Hibernate 配方。

    4. Hibernate 的其他用途包括:

    转基因小鼠基因分型过程中的大脑储存。

    将脑组织运送给合作者。

    基质

    1.我的神经元更多地以细胞簇或细胞团的形式生长,而不是孤立的。怎么了?

    这意味着细胞与自身的粘附比与基底的粘附更紧密。最可能的问题是准备不足的底物。将您的方案与推荐的聚-D-赖氨酸制备和底物涂层进行比较。另一种可能性是电镀密度可能太高。

    2.关于聚-L-赖氨酸与聚-D-赖氨酸,我假设使用聚-D-赖氨酸,因为如果它分解成赖氨酸,则d赖氨酸不能被细胞使用。这有什么道理吗?

    这就是理论。在一些早期研究中(Brain Res. 494:65(1989)),Transnetyx发现差别不大。

    3 . 一些研究人员使用聚乙烯亚胺 (PEI) 代替聚-D-赖氨酸 (PDL)。一个比另一个有优势吗?

    PEI PDL 便宜。Transnetyx PEI 上没有取得太大成功,但 Mark Mattson 在开始在 Neurobasal®/10% 血清中培养后一直使用它。报告表明神经元存活率或峰值率没有显着差异。

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