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topogen
产品时间：2020-07-14
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动塑料DNA（kDNA）
SKU 尺寸 价钱 数量
TG2013-1 25微克 15.00
TG2013-2 50微克 2.00
TG2013-3 250微克 3.00
kDNA产品说明
kDNA是拓扑异构酶II分析的理想底物，因为它对II型反应机制具有特异性。研究人员甚可以在存在大量过量的拓扑异构酶I的情况下检测II型酶。因此，kDNA可以很好地量化粗细胞提取物中的II型活性，而粗提物中经常富含拓扑异构酶I。kDNA底物在人类中的表现异常出色前2a和b以及原核生物酶，例如DNA促旋酶或拓扑异构酶IV。该底物与我们的Topo II分析试剂盒，Topo II药物试剂盒和旋回酶分析试剂盒包装在一起。
由于部分纯化的部分中存在topo I，因此基于超螺旋DNA松弛而采用粗提物进行topo II活性的测定可能会很复杂。由于污染核酸酶活性（由于Mg ++），会引起额外的复杂性，这会降解或切割超螺旋底物。通过使用从昆虫锥虫Crisidia fasciculata的运动塑料中制备的链状DNA底物，可以避免这些问题。动塑料DNA（kDNA）是互锁的DNA小环（大多数为2.5 kb）的聚集体，形成了非常大的高分子量网络。结果，这些网络无法进入琼脂糖凝胶。孵育后 与DNA参与双链断裂和团聚循环的topo II，有效释放了微环状DNA。由于它们的小尺寸，已分离的微型圆迅速移入凝胶。拓扑异构酶I不会发生此反应。反应产物可能如下变化：
质量控制测试：
对于连接的KDNA底物，少90％的DNA将保留在1％琼脂糖凝胶的孔中。
用纯化的拓扑异构酶II测试每批Kinetoplast DNA的变性。
储存缓冲液：
kDNA以产品的浓度储存在10 mM Tris-Cl（pH 7.5）和1 mM EDTA中。
评论和引用：
菲利普斯·JW，格茨·马萨诸塞州，史密斯·SK，辛克·DL，波兰克·J，奥尼西·R，萨洛·S，威尔西·J，阿洛科·J，西格蒙德·J，多尔索·K，李·S，Skwish S，德拉克鲁兹M，马丁·J，维森特Genilloud O，Lu J，画家RE，Young K，Overbye K，Donald RGK，Singh SB：发现Kibdelomycin，这是一种通过金黄色葡萄球菌的化学基因分析方法开发的新型新型II型细菌异构酶抑制剂。 细胞化学与生物学 2011，18：955-965。doi：10.1016 / j.chembiol.2011.06.011。
运输和存放说明：
kDNA应储存在4°C下；但是，可以在-20°C下长期保存。DNA通常在环境温度下运输。
人Topoisomerase II分析试剂盒产品描述
该试剂盒旨在进行快速，特异性的II型真核DNA拓扑异构酶测定。该试剂盒可促进II型酶的纯化和鉴定，并包含II型拓扑异构酶常规检测所需的所有试剂。该测定基于动塑料 DNA（kDNA），并且由于它对II型活性（而非I型）具有特异性，因此可以用粗细胞提取物进行。反应产物使用由TopoGEN开发的新型凝胶系统解析，该系统可以极其快速且明确地检测拓扑异构酶II的活性。包括适当的缓冲液，DNA底物和DNA标记。Human Top2a包含在目录号中以-A表示的套件中。包含拓扑异构酶II脱链和线性DNA标记，可以清晰，轻松地识别用户定义的提取物或级分中的topo II活性。该测定试剂盒还可以与纯化的酶（由TopoGEN提供）结合使用，以检测topo II的抑制剂。kDNA分析将检测刺激topo II切割DNA的毒物以及仅抑制催化活性的物质。
人拓扑异构酶II检测试剂盒内容（用于100个检测试剂盒大小）：
-100单位人类Top2a酶（目录号TG1001-1A提供）-动
塑料DNA（kDNA）20
ug-凝胶上样缓冲液中的
标记线性kDNA- 标记不连续的kDNA（经
Topo II处理）-10X Topoisomerase II测定缓冲液*
--5X终止缓冲液/凝胶加载染料-
详细说明手册
*为了提高稳定性，提供了10x Topo II Assay缓冲液作为两个成分：缓冲液A（无ATP）和缓冲液B（ATP）。每次通过组合缓冲液A和B制成新鲜的10x分析缓冲液。
使用人类拓扑异构酶II检测试剂盒滴定Topo II活性
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