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life-ilab全国代理
产品时间:2020-04-14
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产品货号

产品名称

品牌

11363735001

Hybridoma Fusion and Cloning Supplement

life-ilab

 

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11363735001 罗氏

杂交瘤融合和克隆补充

 

 分析证书(COA) 公告(PDF)

货号与规格    库存       包装规格       安全性

价格(CNY) 数量             

11363735001

 

需要从国外调货,预计到货时间2020年7月6日- 详情     10毫升  

安全数据表   

相关类别       杂交瘤媒体补充剂, 杂交平台, ITS等补品, 无血清培养基, 细胞培养,

更多...

形成      解

打包      pkg 10毫升(50x)

制造商 没有。    罗氏

运入      干冰

储存温度      20°摄氏度

 

产品描述

一般说明

培养基补充剂,由白蛋白,胰岛素,转铁蛋白,细胞因子,胆固醇源,其他定义的有机和无机化合物以及胎牛血清组成(终浓度:0.5%)。

HFCS包含人类蛋白质。已对从中分离出人类蛋白质的原料进行了乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HIV-1 / 2抗体测试,发现呈阴性(根据当前的质量控制程序)。

 

应用

杂交瘤融合和克隆补充剂(HFCS)被用作正常培养基的补充剂,以支持融合后和克隆过程中B细胞杂交瘤的生长。HFCS替代饲养细胞。解冻储存在液氮中的细胞后,它还可用于优化杂交瘤细胞的生长。[1] [2]

 

物理形态

溶液(50x浓缩,pH 7.4);通过孔径为0.2μm的膜过滤

 

准备说明

工作浓度: HFCS(50x)用基础培养基稀释为1:50(v / v)。强烈建议您使用RPMI1640。最终培养基也应包含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。

 

分析笔记

生物活性:测定了杂交瘤细胞系的高克隆效率。

 

其他注意事项

仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

 

Hybridoma fusion and cloning supplement              (HFCs)(50×)              媒体补编              Solution(50×concentrated)

Cat. No. 011 363 735 001 y Version 18

Content version: March 2016   10 ml

产品描述              综述杂交瘤融合和克隆补充(HFCS)是一种              低血清含培养基补充              胎牛血清(FCS)的替代              杂交瘤细胞。              HFCS是专门为优化细胞生长而设计的              低血清细胞培养中新融合杂交瘤的筛选和克隆              媒体。              HFCS的特殊组成进一步避免了              使用饲养细胞的必要性。              成分培养基补充剂,包括白蛋白、胰岛素,              转铁蛋白,细胞因子,胆固醇来源,其他              界定的有机和无机化合物与胎儿              小牛血清(最终浓度:0.5%)。              HFCS含有人类蛋白质。原料来自              人类的蛋白质被分离出来              乙肝表面抗原检测              (HBsAg)以及HIV-1和HIV-2抗体和              发现是阴性的。              生物学的              活动              每一批都要进行高克隆效率的检测              杂交瘤细胞(见图1)。              配方•溶液(50×浓度,pH7.4);              •通过0.2 m孔径膜过滤;              •内毒素(LAL):10 EU/ml,检测支原体              工作              浓度              HFCS浓缩液(50×)用1:50(v/v)稀释              基本培养基。强烈建议使用RPMI              1640年。最终培养基还应含有L-谷氨酰胺和

-巯基乙醇。              应用HFCS是一种血清替代物,含有FCS和              血清白蛋白、胰岛素、转铁蛋白、细胞因子、胆固醇源和其他特异性              有机和无机化合物。              HFCS避免了血清在细胞培养中的额外使用              新融合杂交瘤生长培养基              源自SP 2/0,P3X63Ag8.653。              HFCS的特殊组成进一步避免了              饲养细胞的使用。新融合的生长速度              HFCS辅助培养基中的杂交瘤细胞是              比人内皮细胞要高得多              培养上清液(HECS)-或补充的FCS              中等。杂交瘤HFCS克隆方法的研究              补充培养基比补充培养基更有效率(图1)。              工具包存储/              稳定性              未开封溶液在15至25°C下稳定,直到              标签上的有效期。              注:建议配制适当的等份,避免反复冻融

 

 

程序和所需材料              推荐              媒体              配方              请在下表中找到推荐的              小鼠源性培养基配方              杂交瘤。              1每种培养基配方可能含有进一步的补充剂,例如抗生素、L-谷氨酰胺-              巯基乙醇丙酮酸钠,非必需              氨基酸。              2含氨基蝶呤的帽子中氨基蝶呤的浓度              介质可以通过使用              分离浓缩试剂[补充羟色胺培养基;氨基蝶呤(250×)]。这样就可以稀释氨基蝶呤。              3.杂交瘤从含血清培养基转移到无血清培养基              NUTRIDOMA-SP(需要断奶)(见              备注4)。              4建议将NUTRIDOMA-SP用于SP 2/0              衍生性杂交瘤。              阶跃介质配方              高血清1低血清1游离血清1              融合•任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •未来作战系统(用于              再悬浮              之后的细胞              融合)              任何基础培养基(如RPMI 1640)              冷冻•含FCS              •10%二甲基亚砜(v/v)              选择2•任何基础              中等(例如。,              RPMI 1640)              •10%未来作战系统(v/v)              •10%BM              条件H1              (伏/伏)              •HAT介质补充,1×              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1×HFCS              •HAT介质补充,1×              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1个NUTRIDOMA-CS              •HAT介质补充,1×              筛选•参见选择              克隆•任何基础              中等(例如。,              RPMI 1640)              •10%未来作战系统(v/v)              •10%BM              条件H1              (伏/伏)              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1×HFCS              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •1个NUTRIDOMA-CS              杂交瘤              文化              •任何基底              中等(例如。,              RPMI 1640)              •10%未来作战系统3(v/v)              •RPMI 1640型/              DMEM(1:1)              •0.5–1%FCS3              (伏/伏)              •营养学              •RPMI 1640型/              DMEM(1:1)4              •NUTRIDOMASP 1%

 

选择成功后介绍              阳性组织培养上清液已通过第yi次筛选,下一步是克隆              产生抗体的细胞。单细胞克隆确保              产生感兴趣抗体的细胞              单克隆抗体的分泌              保持稳定。              单细胞克隆有几种方法,例如。,              通过限制稀释,在软琼脂中生长,流式细胞术。              限制稀释法克隆单细胞              如下所示。              尽管如此,每一次尝试都是为了确保              在电镀之前,电池处于单电池悬浮状态              不能保证殖民地不会出现              从两个粘在一起的牢房里。因此,限制性稀释克隆至少应该做两次              (“再克隆”)产生克隆种群。              处理              说明              •如果许多杂交瘤必须同时克隆              时间,可能值得用              使用10毫升或更大的吸管。一滴就够了              吸管将输送大约100微升。              •克隆将在4天后开始出现,并且应该              准备在第7-10天开始放映。              •可以从包含多个              克隆体以及仅包含单个              克隆人。              程序请参考下表。              注:杂交瘤应健康迅速              在克隆时生长的。

 

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