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北京华新康信生物科技有限公司代理Dako 品牌。北京华新康信生物科技有限公司是Dako品牌代理商。
苏木素-伊红(H&E)染色试剂套装大量现货,欢迎选购,合作共赢。
Agilent华新康信
北京华新康信生物科技有限公司专注于生命科学领域,由丰富从业经验的技术团队和管理团队组建而成,主营生物化学试剂,仪器,实验耗材等。
1广泛的产品辐射领域,试剂,耗材,仪器等。
2产品种类齐全,北京华新康信与国外诸多生命科学领域合作众多,
紧跟生命科学的发展,不断满足客户的需求,为各位的科研之路上添砖加瓦!
3 一手货源,价格优势明显
4信誉良好,客户范围广,包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,百泰药业,康龙化成,药明康德等企业。
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苏木素-伊红(H&E)染色试剂套装
Dako CS700(现为Agilent Technologies旗下产品)是一款全自动免疫组化染色系统,专为石蜡包埋组织切片的抗体染色设计,广泛应用于病理诊断、肿瘤分型与科研分析。其核心优势在于标准化、高通量与低人为误差,适用于临床实验室日均百张以上切片的染色需求。
标准操作流程(SOP)
步骤操作内容关键要点
1. 载片准备将石蜡切片(3–5 μm厚)贴于防脱载玻片,60°C烘箱中烤片1小时确保组织贴附,避免脱片;切勿使用过厚切片(>5 μm)影响渗透
2. 脱蜡与水化二甲苯×2(10 min)→ 100%乙醇×2(2 min)→ 95%乙醇(2 min)→ 70%乙醇(2 min)→ 蒸馏水冲洗使用环保脱蜡液可减少毒性;每步需充分浸没切片,避免残留石蜡
3. 内源性过氧化物酶封闭3% H₂O₂(室温,10 min)避光操作;若使用含过氧化物酶的组织(如红细胞丰富样本),此步不可省略
4. 抗原修复根据抗体说明书选择:高压热修复(EDTA/pH 8.0,120°C,2–3 min)或酶修复(蛋白酶K)修复液必须全覆盖组织;修复后自然冷却,禁止冷水骤冷导致组织脱落
5. 洗涤PBS-T(含0.05% Tween-20)×3–5次,每次2 min洗涤不干净是背景非特异性染色的主因;建议使用自动洗板功能
6. 阻水圈绘制使用PAP笔在组织周围画圈(距边缘2–3 mm)防止抗体扩散至玻片空白区;确保圈内无气泡
7. 一抗孵育滴加适量一抗(50–100 μL),湿盒中37°C孵育1 h 或 4°C过夜避免切片干燥;推荐使用Dako即用型抗体(如EnVision+)以简化流程
8. 二抗/检测系统滴加HRP标记的聚合物检测系统(如EnVision+),37°C孵育30 min严禁混用非Dako品牌试剂,否则影响信号放大效率
9. DAB显色DAB显色液现配现用,孵育5–8 min,流水终止显色时间需根据组织类型调整;建议镜下观察控制显色强度
10. 复染与脱水苏木素复染(10–30 s)→ 盐酸酒精分化 → 流水返蓝 → 梯度乙醇脱水 → 二甲苯透明,苏木素过深可导致核染过度;返蓝步骤可使用EDTA pH 8.0修复液提升对比度
11. 封片中性树胶封片,盖玻片使用Dako CS704专用盖片,避免气泡;封片后室温干燥24 h再读片