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肌钙蛋白I心脏
产品时间：2025-06-18
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肌钙蛋白I心脏 - 人类
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猫编号。
8T53
来源：
人类心肌组织。
从器官捐赠者采集的血液样本检测结果显示，其为乙肝表面抗原、HIV-1和HIV-2抗体、丙肝病毒和梅毒螺旋体阴性。
应用程序：
TnI是肌钙蛋白的抑制亚基，肌钙蛋白是细肌丝调节复合物，赋予骨骼肌肌动蛋白-肌球蛋白ATP酶活性对钙的敏感性。
TnI 存在三种同工酶，一种对应于慢肌骨骼肌，一种对应于快肌骨骼肌，一种对应于心肌。两种骨骼肌 (skTnI) 和一种心肌 TnI 形式的氨基酸序列有 40% 的差异。此外，人类心肌 TnI 在其 N 末端区域有骨骼肌形式所没有的额外氨基酸残基，这使得这种蛋白质成为指示心脏特异性的有前途的分析物。在心肌梗死 (MI) 发生后的前 15 小时内，心肌 TnI 的释放模式与 CK-MB 相似，但在血清中保持升高长达 6 天。这种观察和心肌 TnI 的独氨基酸序列使其成为 MI 的重要诊断标志物。
TnI 适用于免疫检测中的标准，用于早期检测心肌梗死、生产抗血清的免疫原和标记物用于碘化。
分析：
纯度 > 98 % (SDS-PAGE)。
免疫印迹法用特异性单克隆抗体与肌钙蛋白I心脏亚型反应，确认免疫活性。
TnI 浓度通过分光光度法测定，使用 A (0.1 %, 280 nm, 1 cm) 等于 0.42。该系数是根据人类 cTnI 的氨基酸组成 (FEBS Lett, 270, 57-61) 计算得出的。
展示：
从0.01 M盐酸冻干。
建议用Tris/尿素缓冲液（20 mM Tris，pH 7.5，7 M尿素，5 mM EDTA，15 mM 2-基乙醇）将此产品重新溶解至接近1 mg/ml的浓度。
在中性pH值和生理盐浓度下溶解度有限。
存储：
冻干 -20°C（允许 -15 … -30 °C）
再溶解 -70°C（允许 -65 … -80 °C）
其他信息：
避免反复冻融。建议在重组成分后分装。
材料安全注意事项：
此产品仅售用于研究或进一步制造。处理此材料时应遵循标准实验室操作程序。
技术说明
血液凝固与贫血•骨代谢•心脏标志物•生育与妊娠•激素标志物•免疫学与血清学•传染病•炎症•肾脏疾病•代谢综合征•神经科学•甲状腺疾病•肿瘤标志物•兽医学
嵌合型心肌肌钙蛋白I抗体
与嗜异性抗体相关的问题已被认知数十年。尽管对嗜异性抗体在普通人群中流行率的估计差异较大，但普遍认为至少达到10%（1）。
当人体接触不同动物或动物源制品时，就会产生嗜异性抗体。这些抗体通常为人类抗小鼠（HAMA）、抗兔、抗山羊、抗绵羊、抗牛、抗猪、抗大鼠或抗马抗体。在免疫诊断领域，该问题最常与HAMA相关，因为大多数诊断检测都使用小鼠源抗体。
HAMA可能导致假阳性或假阴性结果
在诊断检测中，HAMA可能导致假阳性结果，有时也会导致假阴性结果（2-3）。假阳性结果是由HAMA对检测抗体的交联作用引起的，而当HAMA与检测抗体结合并由此阻断抗原结合时，就会产生假阴性结果（见图1）。
![图1. 人类抗小鼠抗体（HAMA）可在免疫测定中引起假阳性和假阴性结果。
假阳性结果可能会延误正确诊断，若该检测用于急性心肌梗死（AMI）等危及生命疾病的诊断，甚至会导致不必要的住院治疗（4）。一项针对因疑似心肌梗死（MI）而接受心肌肌钙蛋白I检测的受试者研究发现，HAMA在cTnI升高的受试者中导致5.5%的假阳性，在cTnI升高但肌酸激酶正常的受试者中导致14%的假阳性（5）。
为解决HAMA带来的问题，大多数检测方法制造商在检测开发过程中会采取额外措施。常用的程序是使用阻断试剂抑制非特异性结合，这些试剂从普通小鼠IgG到更精细的配方不等。尽管在大多数情况下这些措施是足够的，但确实会在材料和人工方面增加额外成本。使用Fab片段也可以抑制HAMA的影响，但这同样增加了一个生产步骤，并增加了每次检测的成本。
临床应用
急性心肌梗死的早期标志物
嵌合抗体有助于避免HAMA效应
在诊断检测中解决HAMA问题的一个有力工具是使用嵌合抗体或全人源化抗体。由于对临界值要求低，且即使在AMI患者的血浆中cTnI水平也非常低，肌钙蛋白检测特别容易受到HAMA的影响。我们现在已通过将抗体恒定区从小鼠来源序列改为人类来源序列，将我们的两种抗心肌肌钙蛋白I（TnI）抗体转化为嵌合蛋白。嵌合cTnI抗体Rec19C7和Rec16A11由负责抗原特异性的原始小鼠来源可变区和IgG1同种型的人类来源恒定区组成（见图2）。
![图2. Hytest嵌合cTnI抗体的示意图
同种型转换对抗体性能无影响
天然19G7抗体的亚类为IgG2b，而嵌合RecChim19C7的亚类为IgG1。为了确定同种型转换是否有任何影响，我们在几种抗体组合中比较了天然和嵌合19C7的性能（见图3）。结果证明两种19C7形式的性能非常相似，观察到的差异在15%以内，这与批间变异系数一致。
![图3. 同种型转换对抗体19C7的性能没有影响。
A）检测步骤的示意图。使用天然（左）或嵌合（右）19C7作为捕获抗体，用Eu³⁺标记的天然抗cTnI（560、MF4、625或560）作为检测抗体，肌钙蛋白复合物作为抗原。
B）如图所示，在四种不同的夹心免疫测定中，将嵌合RecChim19C7（亚类IgG1）的性能与天然19C7（亚类IgG2b）进行了比较。
嵌合抗体可防止体外诊断检测中的HAMA效应
为验证嵌合抗体对HAMA效应不敏感，使用从AMI患者获得的含HAMA的血清样本测试了嵌合抗体和天然抗体的不同组合的性能。血清样本中的HAMA浓度范围为807 ng/ml至6220 ng/ml（见图4）。含HAMA最高的血清在所有基于天然抗体的组合中都产生了非常高的背景信号。同时，含HAMA较低的血清样本产生了较低但显著的背景信号。与此同时，所有使用嵌合抗体的检测在所有测试的HAMA样本中要么没有背景信号，要么只有可忽略的背景信号。
![图4. 嵌合抗体可减轻HAMA效应。
使用三种不同HAMA浓度的血清样本测试了嵌合和天然19C7及16A11在HAMA存在下的性能：样本1中为807 ng/ml，样本2中为1388 ng/ml，样本3中为6220 ng/ml。使用不含血清的缓冲液作为对照。测试了以下免疫测定组合：4C2-19C7和4C2-RecChim19C7（A），4C2-16A11和4C2-RecChim16A11（B），以及19C7-16A11和19C7-RecChim16A11（C）。
该测试结果清楚地表明，使用嵌合抗体可以防止HAMA效应，这使其成为解决这一常见问题的潜在新工具。
订购信息
单克隆抗体
|产品名称|目录号|单克隆抗体|亚类|备注|
|重组嵌合抗cTnI|RC4T21|RecChim19C7|IgG1|酶免疫测定|
|RecChim16A11|IgG1|酶免疫测定|
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