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ApoH捕获BAC试剂盒
产品时间：2025-06-13
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ApoH捕获BAC试剂盒
描述：
ApoHCaptoBAC试剂盒在大多数样本中进行细菌捕获。它包括涂有ApoH的磁珠和一种特别开发的缓冲液，以确保优良的细菌捕获。
样品按照试剂盒说明在缓冲液中稀释后加入磁珠。短暂振荡后，将上清液移除，磁铁（未提供）固定磁珠以保持其在底部。然后细菌在磁珠上浓缩，并且没有潜在的抑制剂。可以使用常规检测方法进行分析。
该产品的保质期为2年，需在28°C保存。该产品有两种测试格式，分别为25或50。
参考编号：MP1001150T
数量：50个测试
价格：839 €（不含税）
成分：
1 mL ApoH 磁珠 (参考编号: MP200011ML)
50毫升缓冲液TTGB 10X（编号：TP1000450ML）
ApoHCaptoBAC 试剂盒
参考文献：MP10011
仅供研究使用
28°C
参考文献
有效期
储存温度范围：28°C
批号
参考编号
ApOHO
提升灵敏度，改进诊断水平
一、简介
ApoH 是一种血浆蛋白，能够结合包括病毒（12）、真菌（3）和细菌（46）在内的微生物。ApoH 蛋白也被称为载脂蛋白 H 或β2 糖蛋白 1。其多特异性特点使得多种微生物的多重检测成为可能。这种亲和捕获方法操作简单、温和且快速，能够让微生物保持活性和感染性。捕获的微生物被浓缩并与潜在抑制剂分离，从而更易于通过常用的特异性技术进行鉴定/检测，进而提高了检测灵敏度（710）。
这些特性使得 ApoHCaptoBAC 试剂盒成为一种创新的样本预处理工具，可用于细菌分离前的操作，以便进行灵敏的鉴定/检测。
二、原理
在 ApoHCaptoBAC 试剂盒中，ApoH 与磁珠结合。该试剂盒配备了一种特殊的结合缓冲液，可增强 ApoH 对细菌的亲和力。将 ApoH 磁珠添加到任何复杂的生物介质中，并在提供的缓冲液中进行稀释。初始样本及其潜在抑制剂可以被去除，而通过 ApoH 与磁珠连接的捕获细菌则利用磁铁保留在试管中。然后，细菌即可用于通过分子技术（如 PCR）、免疫检测（如 ELISA、WB）或在适当培养基中培养等方法进行鉴定/检测。
三、试剂
参考文献 MP20001 ApoH 磁珠
ApoH 包被磁珠悬浮液中，每毫升含有\(10^\)个直径约为 200 nm 的磁珠，悬浮在含有\(<0.02\%\)叠化钠的缓冲液中。
参考文献 TP10004 10X TTGB 缓冲液
10X TTGB 缓冲液是一种浅黄色水性结合缓冲液，经 0.2 µm 过滤且为 10 倍浓缩液。按以下说明进行稀释。
注意：试剂盒中包含的所有试剂均可单独购买。
四、储存
所有试剂在室温下运输时功能不受影响，收到后请储存于 28°C。
所有试剂在 28°C 下可保持稳定直至有效期。
ApoH 磁珠小瓶应直立存放，以确保磁珠始终处于储存溶液中。
使用后，所有试剂应迅速储存于 28°C。
五、所需材料（未提供）
无菌蒸馏水。
合适的微量移液器和无菌过滤吸头。
合适的反应管，玻璃或塑料材质（仅限聚丙烯，避免使用聚苯乙烯）。
孵育过程中用于样本搅拌的合适设备。
可调节至适当温度的培养箱。
层流柜或针对目标微生物类型所需的特定微生物环境。
与试管兼容的侧向吸引专用磁性装置；请注意，不同市售磁铁的吸引效率和速度有所不同。
用于揭示目标微生物所需的材料和试剂。
六、安全与注意事项
为了更好地保持稳定性，所有试剂的处理必须小心，避免任何污染。
是否需要无菌工作区域将取决于捕获微生物的用途（培养时为必需）。
ApoH 磁珠储存缓冲液中含有\(<0.02\%\)的叠化钠。叠化钠的痕量不会干扰捕获过程，也不会影响微生物的活性：使用前无需洗涤磁珠。叠化钠可能与铜或铅管道发生反应，形成爆炸性金属叠氮化物。通过管道处理时，需用大量水冲洗，以防止叠氮化物积聚。
ApoH 是一种源自人类的蛋白质。尽管这种蛋白质是从血浆或血清中纯化而来，并且在采集时根据欧洲法规不含感染性因子（HIV、HBV、HCV），但仍建议将 ApoH 磁珠作为潜在感染性产品进行处理。
试剂和标本的处理应符合良好的实验室规范。未使用的试剂、样本和废物的处理应符合当地法规。
请勿使用过期试剂。
七、重要说明
本方案旨在为最多 5 mL 样本中的细菌结合提供一般指导。根据细菌菌株、样本性质和体积，可能需要进一步优化以实现优良结合能力。ApoH 捕获的机制不同于常规的抗原抗体相互作用。为确保您的实验取得更好的成功，请联系我们的技术支持
在细菌捕获之前，ApoH 磁珠不得涡旋、冷冻、干燥、在高温（>60°C）或极 pH（>9 或 <5）条件下处理。如果需要保留有活力的微生物，捕获后也应采取同样的注意事项。
仅在怀疑微生物负载较高时增加磁珠体积。磁珠能够结合大量微生物：1 µL 磁珠可从纯培养物中结合\(1×10^\)个大肠杆菌。
八、样本采集与处理
我们目前的数据表明，ApoH 磁珠可以捕获各种固体（悬浮后）或液体样本中的细菌。
将固体样本（如肉类、组织）在稀释至 1X 的捕获缓冲液中研磨。然后在添加磁珠之前，用无菌纱布过滤混合物，否则磁珠可能会被样本碎片卡住，无法被磁化。
优先使用新鲜样本，避免混合样本。混合的血液、混合的血清或混合的血浆可能会形成凝块，能够捕获和聚集磁珠，从而使磁珠无法用于结合微生物。
在细菌添加的情况下，使用临床菌株而非“标准"细菌（如 ATCC 菌株 = 美国典型培养物保藏中心菌株）。实际上，许多标准细菌会失去对 ApoH 蛋白或 ApoH 衍生的 Peps6 分子的吸引力。
使用全血时，选择 EDTA 抗凝剂。
所有稀释或处理后的样本应迅速与 ApoH 磁珠接触。
样本体积可按比例放大或缩小。如果怀疑微生物滴度较低，可按比例放大样本体积。对于体积超过 5 mL 的样本，请联系我们的技术支持。
受损的微生物可能会失去对 ApoH 蛋白或 ApoH 衍生的 Peps6 分子的亲和力，因此：
优先使用新鲜材料。
检查冷冻样本中细菌的活力。应避免样本的反复冻融循环。
使用质量较差的起始材料会导致灵敏度降低。
九、使用说明
样本在捕获缓冲液中的稀释
将样本在捕获缓冲液中稀释，然后涡旋。样本稀释后缓冲液的最终浓度必须为 1X：
小体积样本（1199 µL）：将 10X TTGB 缓冲液在无菌蒸馏水中稀释至 1X 浓度。向样本中加入足够的 1X TTGB 缓冲液，使总体积达到 1 mL。
大体积样本（0.25.0 mL）：将 10X TTGB 缓冲液在无菌蒸馏水中稀释至 2X 浓度。将 1 体积的 2X TTGB 缓冲液加入 1 体积的样本中。
捕获
使用前，通过轻轻吸液或手动倒置小瓶底重悬 ApoH 磁珠（请勿涡旋）。
每个样本添加 20 µL ApoH 磁珠。
轻轻混匀（请勿涡旋）。
在 3537°C 下适当搅拌孵育 30 分钟：试管应保持直立并剧烈搅拌，以使 ApoH 磁珠保持悬浮状态。例如，将 Thermomixer 设置为 1000 rpm。
将反应管置于磁铁上，直至所有 ApoH 磁珠侧向沉淀且上清液变澄清。
丢弃上清液，不要扰动 ApoH 磁珠沉淀。此时细菌已浓缩在沉淀中。
洗涤（可选）
纯培养物、血浆或血清无需洗涤。全血等复杂样本可能需要洗涤：
在磁铁上的磁珠沉淀上轻轻加入 1 mL PBS（不含\(Ca^/Mg^\)）。不要悬浮磁珠。
丢弃上清液，不要扰动 ApoH 磁珠沉淀。
如有需要，重复洗涤步骤一次。
十、细菌检测
结合的细菌可使用您的标准方案直接在 ApoH 磁珠上进行检测，必要时可进行调整。注意：对于小体积样本，在添加重悬液之前对磁珠沉淀进行短时间离心。
培养：将 ApoH 磁珠重悬于适当的培养基中。直接将悬浮液接种到培养皿中。在细菌的最适温度下孵育。
PCR：将 ApoH 磁珠重悬于您的裂解缓冲液中。剧烈涡旋 15 秒以破坏磁珠沉淀。裂解步骤后，通过磁铁或在 10,000 g 下离心 1 分钟去除 ApoH 磁珠。将上清液转移到新管中。按照您常用的 DNA 提取和 PCR 方案进行操作。
显微镜观察：将 ApoH 磁珠重悬于 PBS 或您的特定培养基中。磁珠无自发荧光，可用于荧光应用。
其他：将 ApoH 磁珠重悬于适合其他应用的适当溶液中。有关其他特定应用，请联系我们的技术支持。
十一、故障排除
以下提供一些指导原则。如有任何剩余问题、需要进一步信息或需要针对您的特定应用定制方案，请联系我们的技术支持
磁珠和缓冲液的处理
在无菌环境中打开 ApoH 磁珠小瓶：污染会降低稳定性并影响效率。
始终将 ApoH 磁珠添加到样本中，而不是相反。
使用无菌蒸馏水进行缓冲液稀释。检查样本中混合后的 TTGB 缓冲液确实为 1X 浓度。
检查 TTGB 缓冲液是否未被污染。
根据微生物或样本的不同，捕获缓冲液的选择和用量可能需要优化。
大体积样本
大体积样本（5100 mL）需要比试剂盒中包含的更多磁珠和缓冲液。它们可以单独购买。
样本在捕获缓冲液中的稀释：将 2X 或 10X 浓缩的 TTGB 缓冲液直接添加到样本中，以达到 1X 最终缓冲液浓度。
每个样本添加 20 µL ApoH 磁珠，除非样本超过 10 mL。如果是这样，可能需要增加磁珠体积。
超过 20 mL 的样本可以通过轨道搅拌（将轮子设置为 3 rpm）代替 1000 rpm 的直立搅拌进行搅拌。
大体积样本需要时间达到合适的温度。在添加磁珠之前，让样本达到室温或孵育温度。
孵育
遵守孵育的温度和时间，以确保获得优良结果。
选择足够大的试管以确保正确搅拌，例如：使用 1.5 mL 试管进行 1 mL 反应。
试管应保持直立（小试管和中试管）并剧烈搅拌，以使磁珠保持悬浮状态。例如，将 Thermomixer 设置为 1000 rpm。
仅使用玻璃或聚丙烯塑料管，避免使用聚苯乙烯。
磁化
如果上清液中仍有一些磁珠或磁珠沉淀被吸头破坏，增加磁化时间。通常，此步骤的时间范围为 2 分钟（对于细胞培养）至 15 分钟（对于全血）。
使用高能量钕磁铁（812 kg 吸引力），以确保磁珠全磁化。低磁力磁铁会导致磁珠和微生物损失。太强的磁铁可能会将磁珠嵌入塑料管中。
在吸出上清液之前，去除漂浮的气泡。
不要让磁珠磁化超过 30 分钟。微生物的完整性可能会受到损害。
洗涤
细胞上清液、血浆或血清无需洗涤，除非检测系统非常敏感。全血等复杂样本可能需要对磁珠沉淀进行 2 次洗涤。在磁铁上洗涤。切勿在洗涤溶液中涡旋磁珠。
PBS 可以用另一种洗涤缓冲液代替。联系我们的技术支持以检查其与该程序的兼容性。
检测
一些细菌物种在捕获后无法生长。这些细菌处于有活力但不可培养的状态。通过显微镜或 PCR 检查捕获情况。
在适用的情况下，裂解步骤对于成功检测微生物至关重要。裂解缓冲液的效率在很大程度上取决于化学配方，并且可能因供应商而异。如果可能，添加裂解对照以检查效率。不要犹豫在裂解缓冲液中剧烈涡旋 ApoH 磁珠。
如果需要进行光密度测量，请用磁铁去除磁珠，仅测试上清液。磁珠呈深棕色，会极大地干扰光学测量。
品牌是Apohtechnologies Apohtechnologies北京z代理 Apohtechnologies 天津z代理 Apohtechnologies深圳z代理 Apohtechnologies 上海z代理 Apohtechnologies湖北z代理 Apohtechnologies湖南z代理 Apohtechnologies江苏z代理 Apohtechnologies河南z代理 Apohtechnologies河北z代理 Apohtechnologies石家庄z代理 Apohtechnologies深圳z代理 Apohtechnologies广东z代理
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