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蛋白酶抑制试剂
产品时间:2024-12-27
蛋白酶抑制试剂
不含EDTA的cOmplete™蛋白酶抑制剂混合物
该片剂可抑制广泛的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。与其他cOmplete片剂相比,它们不含EDTA - 不含其他螯合 剂, 例如 EGTA - 保持金属依赖性蛋白质的稳定性和功能不受影响。利用IMAC(固相金属亲和色谱)进行的多聚His标签融合蛋白亲和纯化也得到了简化(无需透析)。

蛋白酶抑制试剂

一般描述

不含EDTA的cOmplete蛋白酶抑制剂片剂可抑制广泛的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。与其他cOmplete片剂相比,它们不含EDTA - 不含其他螯合 剂, 例如 EGTA - 保持金属依赖性蛋白质的稳定性和功能不受影响。利用IMAC(固相金属亲和色谱)进行的多聚His标签融合蛋白亲和纯化也得到了简化(无需透析)。
由于优化了片剂的成分,它们对丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶具有出色的抑制作用,并且非常适合保护从动物组织、植物、酵母和细菌中分离的蛋白质。不含EDTA的cOmplete片剂同时含有不可逆和可逆的蛋白酶抑制剂。金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶不受抑制。

不含EDTA的cOmplete片剂与cOmplete片剂相同,区别是不包含EDTA或其他螯合剂(例如 EGTA)。

特异性

几种蛋白酶抑制剂的混合物。用于抑制丝氨酸、半胱氨酸,但不用于抑制金属蛋白酶。

蛋白酶抑制试剂

应用

cOmplete,不含EDTA,能有效抑制细菌、酵母、植物和动物细胞提取物中的丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶。[1][2][3][4]金属及天冬氨酸蛋白酶不受抑制。
不含EDTA的cOmplete片剂用于抑制大体积(高达50ml)的蛋白水解活性,其中EDTA可能干扰蛋白质稳定性(例如,含金属的蛋白质)或随后的检测。由于EDTA会对IMAC(固相金属亲和色谱)产生干扰,不含EDTA的cOmplete更适合多聚His标签融合蛋白的分离过程。
如需在更小的体积(最高达10ml)内对蛋白酶活性进行抑制,我们推荐使用不含EDTA的cOmplete Mini

不含EDTA的cOmplete片剂可按片/50 ml孵育液进行添加。用罗氏通用蛋白酶底物(酪蛋白、试卤灵标记的)测定蛋白水解活性。需要在酸性pH范围内提取或单步分离时,只需加入胃蛋白酶抑制剂和不含EDTA的cOmplete片剂,即可确保抑制天冬氨酸(酸性)蛋白酶。所有实验均在+15至+ 25℃下进行。
不含EDTA的cOplete蛋白酶抑制剂混合物已被用作以下试剂的组分
  • 裂解转染人胚肾(HEK293T)细胞的裂解缓冲液,以及用于斑马鱼胚胎均质的放射免疫沉淀测定体系(RIPA)裂解缓冲液[5]

  • 用于海马组织均质的组织蛋白提取试剂(T-PER)[6]

  • 用于肝细胞裂解的十二烷基硫酸钠 (SDS)裂解缓冲液[7]

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