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Camtag-AT0009
产品时间:2022-11-01
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Camtag-AT0009  Camtag-AT0009

β-肌动蛋白兔单克隆抗体加载控制目录编号: AT0009Actin 是高度保守的蛋白质,参与各种类型的细胞运动,并在所有真核细胞中普遍表达。该抗体在 Jurkat A431 HEK293 HepG2 MCF-7 NIH3T3 PC12全细胞裂解物中均呈阳性信号。这种抗体在下列 FFPE 组织中的 iHC 呈阳性反应: 人类正常皮肤和 IF 中的 HeLa 细胞系。

大小: 100μL 浓度: 1毫克/毫克可用性: 库存 概述抗 -β-肌动蛋白兔单克隆抗体反应性小鼠,大鼠,人体测试应用 WB: 1/1000-1/10000尚未在其他应用中测试。最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。产品图片 人 β-肌动蛋白1-100残基中的免疫原合成肽。克隆性单克隆,克隆号: 9E6同种型兔 IgGForm 液体防腐剂: 0.02% 氮化钠成分: 1% BSAPBSPH7.4贮存指引短期(1-2星期)贮存在摄氏4度以下。分量存放于摄氏零下20度或80度。避免重复的冻结/解冻循环。所有泳道: 1:5000泳道的抗 β-肌动蛋白抗体-负载控制(AT0009)1: Jurkat (人类 T 细胞淋巴细胞样细胞系)全细胞裂解物泳道2: A431(人类上皮癌细胞系)全细胞裂解物泳道3: HEK293(人类胚胎肾细胞系)全细胞裂解物泳道4:HepG2(人肝细胞肝癌细胞系)全细胞裂解物巷5: MCF7(人乳腺癌细胞系)全细胞裂解物巷6: NIH 3T3(小鼠胚胎成纤维细胞系)全细胞裂解物/蛋白质每泳道30μg。在1/3000稀释条件下对兔 IgG-H L- 预吸附(HRP)进行山羊次级多克隆。蛋白质印迹: β-肌动蛋白兔单克隆抗体(AT0009)使用1:1000稀释的该抗体分析不同裂解物上的 β-肌动蛋白。1号车道: HEK293,2号车道: Hela3号车道: PC-12,4号车道: NIH/3T3

细胞骨架由三种类型的胞质纤维组成: 微管,微丝(肌动蛋白丝)和中间丝。球形微管蛋白亚基包括微管构建块,α/β-微管蛋白异二聚体形成所有真核细胞共有的微管蛋白亚基。需要 γ-微管蛋白使微管蛋白亚基的聚合成核,从而形成微管聚合物。许多细胞运动是由微管作用介导的,包括纤毛和鞭毛的跳动,膜囊泡的细胞质运输,减数分裂/有丝分裂期间的染色体排列和神经细胞轴突迁移。这些运动是由于竞争性微管聚合和解聚或通过微管运动蛋白的作用。容量: 100ul容量: 1毫克/毫升可用性: 库存概述/小鼠对 β-微管蛋白的单克隆抗体加载控制反应性人、小鼠、大鼠、兔、猴、牛、仓鼠。经测试的申请: 1/2000-1/10000。预测分子量: 55kDa。尚未在其他应用程序中测试。最佳稀释度/浓度应由最终用户确定。产品图片 这种抗体检测内源性 β 微管蛋白水平。人 β-微管蛋白氨基末端相应的免疫原合成肽。克隆/单克隆,克隆号: 6C4同种型小鼠 IgG1表型液,1mg/mL 小鼠单克隆免疫球蛋白100μgpH7.3(+/-0.1) 50% 甘油0.1 mg/mL 牛血清白蛋白(IgG,无蛋白酶)作为稳定剂,0.02% 氮化钠作为防腐剂。贮存指引短期(1-2星期)贮存在摄氏4度以下。配料及贮存在摄氏零下20度,避免冷冻/解冻循环。数据库链接 SwissProt: P07437 HumanSwissProt: P99024 MouseSwissProt: P69897 RatHostMouse 应用程序 WB ImageWestern 印迹显示人脑(小脑)组织,人脑(下丘脑)组织,小鼠脑(小脑)组织和小鼠脑()组织的裂解物。在大约55kDa (如所示)检测到 β 微管蛋白的特异性条带。本实验是在还原条件下进行的。蛋白质印迹程序1。在0.5毫升冰冷的细胞裂解缓冲液中裂解大约107个细胞(配方如下)。该缓冲液是一种修饰的 RIPA 缓冲液,适用于回收大多数蛋白质,包括膜受体、细胞骨架相关蛋白和可溶性蛋白。这种细胞裂解缓冲制剂可作为一个单独的产品,需要补充蛋白酶抑制剂立即使用前(猫。# FNN0011,温度计)。其他细胞裂解缓冲液制剂,如 Laemmli 样品缓冲液和 Triton-X 100缓冲液,也与本程序兼容。对于每个特定的应用,可能需要对细胞刺激方案和细胞裂解过程进行额外的优化。2.将裂解物以14,000 x g 离心10分钟,清除细胞碎片。或者,裂解物可以在100,000 x g 下超离心30分钟以获得更大的澄清。3.小心地将澄清的细胞裂解物倒入干净的试管中,并用合适的方法测定蛋白质浓度,如布拉德福德试验。建议使用聚丙烯管储存细胞裂解物。4.用等体积的2xLaemmli 样品缓冲液(125mM TrispH6.8,10% 甘油,10% sDS0.006% 溴酚蓝和130mM 二硫苏糖醇[ dTT ])反应裂解物的等分试样,并在100 °C 下将混合物煮沸90秒。5.10 ~ 30μg 的细胞裂解物加入适当的单一百分比或梯度微凝胶孔中,用 SDS-PAGE 电泳分离蛋白质。6.在准备西药转移时,切一块比凝胶稍大的 PVDF。膜在甲醇中浸泡1分钟,然后用 DDH2O 冲洗5分钟。或者,可以使用硝化纤维素。7.在转移缓冲液(配方如下)中浸泡薄膜、2 Whatman 纸和 Western 仪器海绵2分钟。8.将凝胶和薄膜组装到夹层装置中。9.将蛋白质以140mA 的温度在室温下转移6 ° C 0-90分钟。10.转移后,用 Tris 缓冲盐水冲洗膜2分钟。11.用封闭缓冲液(配方如下)4 °C 下封闭膜过夜,或在室温下封闭膜一小时。12.在补充有1% Ig BSA 0.1% 吐温 -20 Tris 缓冲盐水中以1:1000起始稀释度将封闭的印迹与一抗在4 °C 孵育过夜或在室温下孵育2小时。13.用添加0.1% 吐温20 Tris 缓冲盐水洗涤印迹。14.使用合适的第二抗体,如山羊抗兔 IgG 结合的 HRP (Cat# AT0097-100ulEngibody)或山羊抗小鼠 IgG 结合 HRP (Cat# AT0098-100ulEngibody)与您的化学发光试剂和仪器一起使用。故障排除指南西部印迹故障排除1。没有信号。高背景3。非特定波段4。波段大小错误5。黑色/灰色污点上的白色条纹6抹黑"1。故障排除: 无信号样品准备未经测试的物种?积极控制。检查校准。样本中或凝胶上的抗原不足。转移到膜上转移不良。过度清洗。阻塞太多阻塞。优化封闭剂、浓度和时间交叉反应封闭剂/抗体。抗体孵化和检测抗体不足。第二抗体不正确。检测试剂盒旧基质无效。2.故障排除: 高背景转移到膜. 膜的选择。阻塞需要阻塞更长时间。优化封堵剂、浓度。封闭剂与一级或二级封闭剂之间的交叉反应。磷酸化特异性蛋白质: 使用酪蛋白阻断。抗体孵化和检测一级抗体浓度过高。孵化温度过高。3.故障排除: 非特异性条带样品制备细胞系在其蛋白质表达谱上可以积累差异。蛋白质有多种修饰形式,改变了流动性。目标蛋白质成片段-被蛋白酶降解或切割。剪接变体/同种型或可能来自同一家族的蛋白质。蛋白质的多聚体(二聚体)(还原和变性)乐队可能不是特定的。运行无主控制阻塞阻塞不足。优化注意力,时间。抗体孵化和检测一级或二级抗体浓度过高。抗体尚未提纯。

4.故障排除: 不正确的带宽大小样本准备确保样本减少和变性,除非在数据表中另有说明。检查异构体。样本是否为重组片段?这些将运行在不同的大小。5.故障排除: 白色条带/黑色印迹过多的一级抗体和/或过多的二级抗体。6.故障排除: “涂抹"•过载,蛋白质降解。

北京华新康信也有Camtag实验试剂销售,下面给大家讲讲Camtag服务以及实验样本;Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio  Toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin  Camtag实验  Camtag试剂 Camtag说明  Camtag产品方案Camtag实验说明  Camtag说明书 Camtag技术参数 Camtag方案对比  Camtag优势介绍  Camtag广州实验试剂 Camtag深圳试剂Camtag说明书 Camtag技术参数Camtag实验方案Camtag技术对比Camtag购买说明 Camtag天津试剂 Camtag北京试剂Camtag厦门试剂Camtag大理试剂Camtag武汉试剂Camtag福建试剂Camtag安徽试剂Camtag广西试剂Camtag厦门试剂Camtag常州试剂Camtag安徽试剂Camtag长沙试剂Camtag哈尔滨试剂Camtag沈阳试剂Camtag深圳试剂Camtag武昌试剂Camtag湖北试剂Camtag湖南试剂Camtag上海试剂Camtag ForteBio实验试剂,moltox实验试剂,toxin实验试剂,ForteBio  moltox  toxin 各种试剂的实验参数,说明书,欢迎咨询  Camtag产品介绍  Camtag产品介绍  Camtag研究方案

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