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Abmgood全国代理
产品时间:2020-04-12
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RNAi技术

对于基因调控和功能研究,abm提供了多种表达系统,用于:

 

siRNA:有效表达任何靶siRNA来敲除任何基因,而无需设计发夹环shRNA结构,可在慢病毒,AAV和腺病毒中使用。

miRNA:使用我们现成的病毒载体和包装好的病毒以及我们的检测和定量工具,抑制或过表达任何miRNA,以研究哺乳动物系统中的转录后基因调控。

UTR Reporters:使用我们的3'UTR或5'UTR平台定量研究特定miRNA对靶基因的调控,这些平​​台均可作为针对任何人类,小鼠或大鼠基因的预制慢病毒载体和慢病毒的库提供。

 

慢病毒siRNA文库

来自abm的iLenti™RNAi表达系统允许通过转染或慢病毒感染靶细胞来有效表达任何siRNA。该系统基于独特的收敛启动子设计,可实现更高的靶基因敲除效率,而无需单个启动子载体中通常使用的发夹环结构。abm提供了人类,小鼠和大鼠siRNA的全面文库,可提供载体或预包装的慢病毒格式

 

 

iLenti™siRNA的优点:

 

慢病毒载体中的siRNA,用于转染或病毒感染。

非常稳定和高产的质粒;不需要特殊的感受态细胞。

使用比传统的19或21 bp寡核苷酸更有效的27-29 bp寡核苷酸。

聚合启动子可避免发夹环结构,使测序和质粒生长更加容易。

GFP报告基因,用于监测转染或病毒感染。

所有构建体均可以载体或病毒形式获得,包括用于改善基因敲除的合并病毒。

 

siRNA集是否由带有shRNA或siRNA的慢病毒载体组成?您是否验证RNA干扰?

我们的RNA干扰慢病毒载体包含siRNA。我们采用双收敛启动子系统,其中siRNA的有义和反义链由两个不同的启动子表达,而不是在发夹环中表达-以避免可能发生的任何重组事件。

 

如果您感兴趣的基因没有经过验证和发布的siRNA序列,我们将使用siRNA设计软件来定位合适的靶位点。如果这些设计的siRNA在您的实验中不能有效地降低基因表达,我们将提供一次替代(免费),其中将包含一组新的序列供您尝试。

 

Abm保证一组购买的四个siRNA Lentivector构建物中至少有一个在合适的靶细胞中具有超过70%的击倒效率,显示出> 80%的转染效率。如果仍然认为这四个构建体无效,那么该基因很可能对siRNA敲低不敏感。

 

慢病毒miRNA表达

miRNA模拟物用于功能评估,并用作功能获得研究的有用的外源工具。abm的表达miRNA的慢病毒可让您的细胞系稳定,长期表达miRNA。

 

为了满足您的所有需求,我们提供同时表达初级miRNA和成熟miRNA的miRNA慢病毒。初级miRNA的表达意味着将表达miRNA周围的整个区域,并且前体的两个臂都将被加工,就像它是内源的一样。我们成熟的miRNA表达载体是专为高水平表达和加工成熟miRNA而设计的。

 

 

主要特征

 

我们提供了来自人类,小鼠和大鼠的6500多个成熟和主要miRNA的集合。

慢病毒递送,用于将遗传物质整合到宿主细胞中,引起稳定的长期基因表达。

慢病毒具有广泛的宿主范围,可以感染分裂细胞和非分裂细胞,从而可以将基因传递给多种细胞类型。

 

产品信息

miRNA结合

工作流程

我们提供合成,载体或病毒形式的miRNA过表达/模拟产物和miRNA抑制剂,以适合您的实验。

pLenti-III-mir-GFP,pLenti-III-mir,pLenti-III-mico-GFP,pLenti-III-mico矢量图

载体图

我们的miRNA过表达产品可提供或不提供GFP,并可提供过早的miRNA插入片段或成熟的5p和3p miRNA插入片段。

 

什么是Sanger miRBase序列数据库?

miRBase是由Sanger研究所建立的序列数据库。microRNA Registry中的每个条目均代表microRNA转录本的预测发夹部分(在数据库中称为mir),其中包含有关成熟microRNA序列(称为miR)的位置和序列的信息。该数据库在结果发布之前为microRNA基因猎人提供了新颖的microRNA基因的唯yi名称,并为已发布的microRNA提供了可搜索的数据库。

 

       pLenti-III-miR-Off系统或LentimiRa系统使用空白载体进行对照,但我通常使用加扰对照进行si-RNA实验。是否支持使用未加扰的miRNA实验空白对照?

加扰和空白对照都是有效的阴性对照。但是,在使用加扰序列时,脱靶效应存在争议。通过使用空白载体作为阴性对照,可以消除脱靶效应。如果您的实验需要对空白控件进行加扰的控件,我们也可以根据要求为您定制。

pre-miRNA和GFP是否都在同一CMV启动子下?如果是,那么两者之间是否存在翻译切割位点?

是的,pre-miRNA和GFP都在同一CMV启动子下。

 

两者之间没有翻译切割位点。

 

转录终止位点在pre-miRNA之后,因此GFP和pre-miRNA一起转录,因此使GFP成为miRNA的实际转录报告基因。mRNA的pre-miRNA区域自身折叠并形成茎环结构,该茎环结构将在细胞中被Drosha / Pasha酶处理,并从mRNA的GFP部分切割下来。

 

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