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Cellutron全国代理Cellutron 北京代理
产品时间:2020-03-16
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北京华新康信生物科技有限公司代理cellutron品牌。北京华新康信生物科技有限公司是 cellutron品牌授权代理商。

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产品列表如下:

产品货号       产品名称       品牌

ac-7018  Adumyt kit    cellutron代理 北京华新康信生物科技有限公司

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Cellutron代理 北京华新康信生物科技有限公司

 

北京华新康信生物科技有限公司专注于生命科学领域,由丰富从业经验的技术团队和管理团队组建而成,主营生物化学试剂,仪器,实验耗材等。

1广泛的产品辐射领域,试剂,耗材,仪器等。

2产品种类齐全,北京华新康信与国外诸多生命科学领域大品牌合作众多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,Favorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凯杰,义翘,sciencell;价格优势品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,ForteBio,CanSyn,polyplus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell,   listlabs, ZYMO , ABclonal  , EY laboratories  ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,nist ,americanelements,cayman  , Fisher ,thermofisher ,  nanopore,   日立,  三菱株式会社 ,RD, takara等,紧跟生命科学的发展,不断满足客户的需求,为各位的科研之路上添砖加瓦!

3 一手货源,价格优势明显

4信誉良好,客户范围广,包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,百泰药业,康龙化成,药明康德等知名企业。

欢迎电话垂询

 

Cellutron稳定的细胞系发展

Cellutron提供定制的高质量稳定细胞系服务,以优化您感兴趣的蛋白质的生产。基因到细胞服务包括基因合成,靶向载体的构建,细胞培养,转染以及稳定细胞系的药物选择和转基因表达的确认。借助zui先进的载体技术,Cellutron能够在多种细胞类型(包括小鼠和人类干细胞以及iPS细胞)中产生稳定的细胞系。

稳定的细胞系发展

Cellutron提供定制的高质量稳定细胞系服务,以优化您感兴趣的蛋白质的生产。基因到细胞服务包括基因合成,靶向载体的构建,细胞培养,转染以及稳定细胞系的药物选择和转基因表达的确认。借助zui先进的载体技术,Cellutron能够在多种细胞类型(包括小鼠和人类干细胞以及iPS细胞)中产生稳定的细胞系。

稳定细胞系    稳定细胞系

最初转导荧光报告基因两个月后,稳定转染的小鼠胚胎干细胞表达GFP或RFP。

亲代细胞系:人和小鼠胚胎干细胞和iPS,HEK293,CHO,BHK,NS0细胞,H9C2或您指定的细胞系。

稳定细胞系生成的过程和时间表:

1.哺乳动物细胞表达载体的基因合成与构建           

执行优化的基因合成并将基因克隆到哺乳动物细胞表达载体中(1周)

2.转基因表达分析      

用表达载体转染亲代细胞系,并通过RT-PCR / Western blot / ELISA评估转基因的表达(1周)

3.稳定转染子的筛选

对顶ji克隆进行稳定性筛选,并评估10个传代的最终细胞系。(约4周)

向客户交付2瓶顶ji稳定克隆

心肌细胞分离

快速,改进的系统,产量高

原代细胞分离系统,科学家必不可少的工具

转基因和miRNA表达的微圆载体

订单信息

一般信息

安全有效的载体系统的开发是在真核细胞中成功进行基因转移的关键步骤。

小环载体是新颖的超螺旋最小表达盒,其通过在大肠杆菌中体内的位点特异性重组衍生自常规质粒DNA 。小圆载体不携带抗生素抗性基因,也不携带细菌复制起点,因此显着降低了免疫和炎症反应,并有效地保护了转基因表达不会由于细菌主链序列而被沉默。

在大肠杆菌中,通过定点重组从体内的亲本质粒产生了微环载体。亲本质粒携带有位于位点特异性Cre重组酶的两个突变loxP位点(即,每侧的末端5个核苷酸的突变)侧翼的真核表达盒,并在大肠杆菌的控制下转化入表达Cre重组酶的工程化大肠杆菌菌株。 pBAD / araC启动子。

L-阿拉伯糖可有效诱导细菌菌株中Cre重组酶的表达,从而切除中间的DNA序列。两个loxP位点之间的重组促进了亲本质粒分裂成两个超螺旋DNA:(1)带有用于转基因和miRNA的真核表达盒和双突变loxP位点的微圆载体,以及(2)包含细菌主链序列和野生型loxP位点。双突变loxP位点的形成损害了Cre重组酶对序列的识别,导致平衡向小圆载体生产的转移。在诱导Cre重组酶之后,从细菌裂解物中分离出不同形式的超螺旋DNA,并进行限制酶消化以线性化亲本质粒和微质粒。随后,使用氯化铯梯度进一步纯化微圆载体。

基于miRNA的基因敲低

基于Cellutron miRNA的基因敲除(KD)具有以下优点:

1.具有高度序列特异性,与靶基因具有100%的同源性

2.比其他基因敲除方法(例如siRNA)更有效

3.允许将两个或多个miRNA结构克隆到同一表达盒中,以进行单个或多个靶标敲除。

4.具有强大的Pol II启动子,可在多种细胞类型中高效表达miRNA。5

5.产生稳定的基因敲除细胞系

6. GFP或RFP报告基因的表达,用于监测转染效率

7.细胞毒性很小或没有

诱导表达载体系统

Cellutron用Cre-Loxp技术开发了一种新型的诱导表达系统,并提供了调节转基因表达的能力。该系统包含两个具有强大CAG启动子的表达载体,用于高效基因表达。pEGFP / RFP-miRNA-BL和pEGFP / RFP-T2A-GOI-BL是表达载体,其EGFP和3X终止序列旁接两个loxP位点,其后是顺顺反子序列,用于表达RFP和miRNA或编码蛋白质的转基因。另外,在miRNA和编码蛋白质的转基因的表达盒的下游克隆了杀稻瘟菌素(BL)表达盒(用于在哺乳动物细胞中选择药物)。与可诱导表达载体共转染需要pCreER-IRES-Puro。

共转染后,系统最初仅表达EGFP,即一种报告蛋白,可方便地监测转染效率。可以在体外和体内添加4-OHT,以激活Cre重组酶的条件活性形式,从而导致miRNA或编码蛋白质的转基因的高水平和调控表达。

诱导表达系统使您能够:

1.在分裂和非分裂细胞(包括成体和胚胎干细胞以及iPS细胞)中高效转染。

2.在体内和体外条件表达miRNA或编码蛋白质的转基因。

3.生成稳定的细胞系,以长期表达miRNA或编码蛋白质的转基因。

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