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Novus全国代理 Novus 北京代理
产品时间:2020-03-16
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NBP1-71648 Novus  大量现货,欢迎电联,真诚合作共赢。

NBP1-78159 Novus 大量现货,欢迎电联,真诚合作共赢。

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Novus代理 北京华新康信生物科技有限公司

产品列表如下:

产品货号       产品名称       品牌

NBP1-71648  Mouse Monoclonal mtTFA Antibody (18G102B2E11)       NOVUS

H00011232-B01P Mouse Polyclonal POLG2 Antibody    NOVUS

NB110-7081H      Mouse anti-Human IgG4 Fc fragment Secondary Antibody (5C7) [HRP] novus

NBP1-78159  Mouse Monoclonal LDL R Antibody (C7)   NOVUS

NB100-56698       Rabbit Polyclonal MyD88 Antibody [IMGENEX: IMG-178]       NOVUS

NBP2-62766  Human HMGB1/HMG-1 ELISA Kit (Colorimetric)     NOVUS

NBP1-47518AF488      Calreticulin Antibody (1G6A7) [Alexa Fluor 488]       novus

北京华新康信生物科技有限公司专注于生命科学领域,由丰富从业经验的技术团队和管理团队组建而成,主营生物化学试剂,仪器,实验耗材等。

1广泛的产品辐射领域,试剂,耗材,仪器等。

2产品种类齐全,北京华新康信与国外诸多生命科学领域大品牌合作众多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,Favorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凯杰,义翘,sciencell;价格优势品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,ForteBio,CanSyn,Novus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell,   listlabs, ZYMO , ABclonal  , EY laboratories  ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,novus ,americanelements,cayman  , Fisher ,thermofisher ,  nanopore,   日立,  三菱株式会社 ,RD, takara等,紧跟生命科学的发展,不断满足客户的需求,为各位的科研之路上添砖加瓦!

3 一手货源,价格优势明显

4信誉良好,客户范围广,包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,百泰药业,康龙化成,药明康德等知名企业。

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肽封闭-一种确认抗体特异性的方法。

背景:抗体与目标表位的特异性结合是产生准确表达数据所必需的。抗体与非靶标抗原的结合(也称为非特异性结合)会增加背景信号并使数据解释复杂化。在蛋白质印迹分析中,通常会通过多个条带轻松识别非特异性结合。但是,在免疫组织化学,ELISA,流式细胞仪,ChIP和其他基于抗体的应用中,非特异性抗体结合的鉴定可能更加困难。

什么是封闭肽?封闭肽是由对应于抗体表位(抗体识别的抗原的特定片段)的氨基酸序列组成的肽。阻断肽将与靶抗体特异性结合,从而防止随后的抗体与靶表位结合。

 

封闭肽如何发挥作用?可以利用抗体对其表位的高亲和力来确认结合特异性。用足够的肽对抗体进行预温育会占据所有抗体结合位点,从而阻止样品中后续靶蛋白的结合。

运行封闭肽测定后如何知道我的抗体是否特异性?为了确认抗体的特异性,比较用对照抗体和封闭抗体染色的样品之间的信号强度。如果抗体对目标表位具有特异性,则与封闭抗体一起孵育的实验样品将显示出比对照抗体(单独的抗体,未封闭)弱的信号。

在Western blot中我的肽封闭数据应该是什么样的?如果抗体与过量的肽一起孵育并且所有结合位点都被占据(封闭),则与封闭抗体一起孵育的样品应无信号。

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蛋白质印迹法

介绍

蛋白质印迹使用抗体来识别细胞或组织裂解物中的单个蛋白质。抗体与高度特异性的氨基酸序列结合,称为表位。由于氨基酸序列因蛋白质而异,因此蛋白质印迹分析可用于鉴定和定量包含数千种不同蛋白质的裂解物中的单个蛋白质。首先,通过SDS-PAGE凝胶电泳根据蛋白质的大小将蛋白质彼此分离。接下来,通过施加电流将蛋白质从凝胶转移到膜上。然后可以用对目标靶蛋白具有特异性的一抗处理该膜。下一个,

裂解液的制备

亚细胞定位    推荐缓冲液

全细胞裂解液       NP-40

核    里帕

线粒体    里帕

细胞质    盐酸

膜结合蛋白    里帕

吸出PBS,并加入冰冷的裂解缓冲液(每融合10 7个细胞/ 100mm皿/ 150 cm 2烧瓶加入1 mL )。请参见下表,以根据目标蛋白质的亚细胞位置推荐裂解缓冲液。

用冰冷的PBS在冰上洗涤细胞培养皿。

吸出PBS,并加入冰冷的裂解缓冲液(每融合10 7个细胞/ 100mm皿/ 150 cm 2烧瓶加入1 mL )。请参见下表,以根据目标蛋白质的亚细胞位置推荐裂解缓冲液。

使用细胞刮刀,将粘附的细胞从培养皿上刮下来,并将细胞悬浮液转移到微量离心管中。如果需要,可以将细胞用胰蛋白酶消化并用PBS洗涤,然后再重悬于裂解缓冲液中。

在4°C下搅拌细胞30分钟。

在4°C下离心细胞裂解液混合物。时间和离心力因每种细胞类型而异,但是一般指导原则是在12,000 rpm下20分钟。

将上清液(裂解液)转移到冰上的新试管中。

样品制备

确定每个细胞裂解液的蛋白质浓度。

确定要加载的蛋白质量(推荐:10-50μg/泳道),并添加等体积的2X Laemmli缓冲液。

通过将裂解液在样品缓冲液中于95-100°C下煮沸5分钟来减少样品并使样品变性。仅在抗体数据表建议使用非还原或非变性条件时才应跳过此步骤。

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